Zawartość
- etapy
- Metoda 1 Bezpośrednio obserwuj bakterie
- Metoda 2 Pomiar biomasy
- Metoda 3 Postępuj za pomocą turbidymetrii
Istnieje kilka sposobów pomiaru wzrostu bakterii, a niektóre z nich są trudniejsze do wdrożenia niż inne. Najprostsze są powszechnie stosowane i dają stosunkowo dokładne wyniki, pod warunkiem, że są rygorystyczne podczas pomiarów. Najczęstsze techniki to obserwacja i liczenie bakterii, pomiar biomasy i suchej biomasy oraz turbidymetria. Laboratorium szkolne powinno mieć sprzęt niezbędny do co najmniej jednej z tych metod.
etapy
Metoda 1 Bezpośrednio obserwuj bakterie
-
Przygotuj sprzęt. Oprócz tego, co zwykle znajduje się we wszystkich laboratoriach biologicznych, będziesz potrzebować pewnych konkretnych przedmiotów. Upewnij się, że masz pod ręką wszystkie instrumenty i pojemniki, abyś nie musiał chodzić tam i z powrotem w szafie, w której przechowywany jest sprzęt. Zastanów się, co zrobisz, aby wiedzieć, czego będziesz używać na każdym etapie. Będziesz także musiał znać kilka kluczowych terminów.- Uzyskaj hemacytometr. Jest to ostrze z komorami numeracji, które jest powiązane z mikroskopem. Jest to bardzo łatwy instrument do regulacji i użytkowania. Znajdziesz u niektórych dostawców specjalizujących się w sprzęcie dla szkół i laboratoriów badawczych. Zwykle dostarczana jest instrukcja obsługi.
- Weź szalkę Petriego. Jest to mały, okrągły, płytki pojemnik, w którym można obserwować bakterie.
- Termin „kultura” odnosi się do mikroorganizmu, który jest sztucznie rozmnażany w ramach eksperymentu naukowego.
- „Rosół kultury” to medium, w którym kultura będzie się rozwijać.
-
Użyj szalki Petriego. Włóż bakterie do pudełka i obserwuj pod mikroskopem. Możesz także umieścić go bezpośrednio na slajdzie. Następnie policz liczbę obecnych komórek bakteryjnych. -
Upewnij się, że masz właściwą koncentrację. Jeśli jest za dużo bakterii, będą się one nakładać i nie będzie można ich poprawnie policzyć. W takim przypadku należy rozcieńczyć kulturę, mieszając ją z niewielką ilością bulionu. Jeśli będzie ich za mało, wynik nie będzie znaczący. Następnie należy przefiltrować bulion, aby zwiększyć stężenie. -
Policz bakterie. Ostatnim krokiem jest po prostu liczyć. Spójrz na komory zliczające pod mikroskopem i zanotuj liczbę komórek, które widzisz. Porównaj wynik z innymi podobnymi doświadczeniami.
Metoda 2 Pomiar biomasy
-
Sprawdź, czy masz niezbędne instrumenty. Ta metoda jest powolna do wdrożenia i wymaga użycia drogiego sprzętu. Jeśli go nie umyjesz, użyj innej techniki. Z drugiej strony, jeśli laboratorium, w którym się znajdujesz, ma odpowiednie narzędzia, pomiar biomasy i suchej masy jest idealny, ponieważ daje dokładne wyniki. Potrzebujesz:- piec hydrauliczny z konwekcją wymuszoną,
- aluminiowa szalka,
- kilka kolb Erlenmeyera,
- wirówka lub laboratoryjny system filtracji.
-
Sprawdź, czy uprawa znajduje się w kolbie Erlenmeyera. Jeśli tak nie jest, wlej to. Na tym etapie eksperymentu bakterie nadal znajdują się w bulionie hodowlanym. Zostaną rozdzieleni później. -
Osuszyć szalkę. W tym celu włóż do piekarnika. Można również zastosować filtr membranowy z octanu celulozy o średnicy 47 mm z porami 0,45 μm. Niezależnie od tego, które narzędzie zostanie użyte, dokładnie zmierz jego masę, aby można było ją odjąć od wyników uzyskanych po umieszczeniu na niej uprawy. -
Mix. Mieszać lerlenmeyera, aby kultura była jednorodna. Rzeczywiście, z powodu grawitacji komórki naturalnie mają tendencję do opadania na dno pojemnika. Musisz więc trochę wstrząsnąć, dla których są rozprowadzane w jednolity sposób, a Twoja próbka jest bardziej reprezentatywna. -
Wirówka. Za pomocą wirówki oddzielić bakterie od bulionu hodowlanego. To urządzenie służy do obracania kontenera i przeciwwagi z bardzo dużą prędkością. Rosół płynie, co utrzymuje tylko żywą materię. Aby uzyskać więcej informacji, znajdziesz informacje na temat korzystania z wirówki w Internecie. -
Zdobądź ciasto. Upuść go na szalce. Możesz wrzucić bulion kulturowy, już go nie potrzebujesz, ale trzymaj Lerlenmeyera pod ręką. -
Opłukać wirówkę. Oprócz komórek bakteryjnych wlej wodę do płukania na szalkę. Wynik uzyskany dla wszystkiego daje biomasę. -
Znajdź suchą masę. Aby poznać suchą biomasę próbki, umieść szalkę w piekarniku ustawionym na 100 ° C na okres od 6 do 24 godzin, zgodnie z instrukcjami dostarczonymi z urządzeniem. Uważaj, aby nie przekroczyć tej temperatury, aby uniknąć spalania bakterii. Następnie zważ wszystko, a następnie odejmij masę tacy.
Metoda 3 Postępuj za pomocą turbidymetrii
-
Przygotuj swój sprzęt. Będziesz potrzebował źródła światła i spektrofotometru, urządzenia występującego w większości laboratoriów naukowych. Zapoznaj się z dostarczoną instrukcją obsługi, ponieważ każdy model ma własną obsługę. Ta metoda jest jedną z najczęściej stosowanych do pomiaru wzrostu bakterii, ponieważ wymaga tylko niedrogich i łatwych w użyciu narzędzi. -
Wprowadź światło do kultury. Zmętnienie służy do oceny zawartości cieczy w cząstkach, określa się, czy jest bardziej lub mniej mętna. Wynik uzyskany z tego pomiaru zostanie podany w NTU (lub nefelometrycznych jednostkach zmętnienia). Może być konieczne wykonanie kalibracji urządzenia w celu dokładnego zmierzenia zmętnienia próbki. -
Rób notatki. Zmętnienie to ilość bakterii w próbce. Spektrofotometr pozwoli również poznać transmitancję roztworu (% T), którego wartość jest odwrotnie proporcjonalna do zmętnienia. Następnie porównaj wyniki uzyskane dla różnych próbek, aby zmierzyć wzrost bakterii.